甲流未退,乙流又来?病毒核酸提取如何避免假阴性?
“甲流刚好,又感染了乙流。”继甲流之后,乙流又受到公众关注。流感病毒可分为甲、乙、丙、丁四种类型,引起流感季节性流行的主要是甲型和乙型流感病毒,不同的流感流行季或同一流感流行季的不同时期,甲型和乙型流感病毒的构成也会交替发生变化。
数据来源:国家流感中心
最新监测数据显示,南、北方省份流感病毒检测阳性率下降。乙型流感占比上升,甲型流感占比下降,但甲型流感依旧占据主导地位,二者呈现叠加流行的态势。不排除后期出现乙型流感比例持续增加,成为主要流行类型的可能。
近期流感病毒肆虐,通过对流感病毒核酸检测判断是否感染,对于疾病诊断和个体健康管理至关重要。核酸是分子诊断的基础,核酸提取作为分子诊断实验的“第一步”,也是最关键的一步,其获得的核酸质量的优劣直接影响到下游分子生物学试验的成败。随着医学研究的不断发展,临床分子诊断衍生出不同应用场景和检测需求,因此对于核酸提取的要求也不尽相同,进一步推动了核酸提取纯化技术的发展。
检测系统中任何一个环节(如样本、人员、仪器、试剂、操作等)出现问题,可能都会导致核酸检测假阴性结果。除前期的样本采集、转运、灭活等处理,核酸检测产品在检测过程中主要分为2个步骤,即核酸提取、扩增检测。扩增检测部分主要取决于前步骤核酸提取的纯度,以及扩增仪器的性能。所以,核酸检测产品本身的差异性关键在于“核酸提取”这一步。
“假阴性”是指在病毒核酸检测中,实际上存在目标病原体的核酸,但检测结果却显示为阴性。换句话说,即使人体感染了病原体,但由于某种原因,核酸检测未能正确检测到病原体的存在。
这可能是由于提取方法不当、样本污染、试剂质量不佳等因素引起的。假阴性的存在可能会影响我们对病毒感染状况的准确判断,进而影响治疗和预防措施的制定。
1、样本采集不当
某些病原体的核酸在感染初期可能存在数量较少,如果在感染初期采集样本可能无法检测到目标病原体的核酸。样本采集时,如果操作不规范或不完全按照指导进行,可能导致样本中的核酸被污染或破坏,从而影响检测结果的准确性。
2、检测方法的局限性
不同的核酸检测方法对于不同病原体的敏感性有所差异,有些方法可能无法检测到低浓度的目标病原体核酸。而且,核酸检测方法的灵敏度可能存在一定的限制,无法检测到低浓度的目标病原体核酸,从而产生假阴性结果。
3、病毒变异导致的检测失效
流感病毒属于RNA病毒,基因组变异能力强,可能导致核酸检测方法无法识别新的病毒株,从而产生假阴性结果。病毒的突变位点可能位于核酸检测方法所使用的引物或探针的结合位点,导致无法正常扩增或检测目标病原体的核酸。
1. 优化核酸提取方法
对于检验工作人员来说,精准、高效、安全的核酸提取方案,更加深入人心。“磁珠法技术”相较于其他核酸提取技术更加简化了操作步骤,可降低气溶胶污染的风险,降低交叉感染的几率;且纯度更高,灵敏度和准确度更高,可让搭载此提取技术的病毒核酸检测试剂灵敏度更高。
2. 严格控制样本质量
样本的质量直接影响核酸提取的成功率。我们需要确保样本的采集、储存、运输等环节都符合规范,以减少样本污染和降解的风险。
3、选用适合的仪器和试剂
针对病毒核酸提取,我们需要选择适合的核酸提取试剂和设备。挑选市面上合适靠谱的试剂盒,需具备高灵敏度和强特异性的特征,提高检测成功率,以减少假阴性结果的发生。同时,根据样本特性,调整提取过程中的温度、时间、离心转速等参数,以提高核酸提取的效率和质量。
4、建立质量控制系统
为了确保核酸提取试剂和设备的稳定性,我们需要建立一套严格的质量控制系统。通过定期检测试剂和设备的性能,可以及时发现和解决潜在问题。
病毒DNA/RNA总核酸提取试剂盒(磁珠法)
病毒DNA/RNA总核酸提取试剂盒(磁珠法)可对呼吸道核酸检测样本(痰液、鼻咽拭子)中核酸实现高效提取,其中对于难处理的传统痰液样本,也具有以下技术优势,所获得核酸能更好应用于下游呼吸道病原体核酸检测。
场景灵活:支持手动提取及高通量全自动核酸提取仪配套使用。
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